一、带状疱疹动物模型构建实验动物选择
1. 常用动物及特点
动物模型 | 优点 | 缺点 | 适用研究 |
豚鼠（Guinea Pig） | 对VZV敏感，可潜伏感染 | 症状较轻，不易自发再激活 | 潜伏感染模型 |
恒河猴（Rhesus Macaque） | 接近人类VZV感染 | 成本高、伦理限制 | 疫苗/抗病du药评估 |
人源化小鼠（huNSG） | 可感染人VZV | 免疫系统不完整 | 病毒-宿主互作研究 |
大鼠（Rat） | 可诱导神经痛 | 不自然感染VZV | 带状疱疹后神经痛（PHN）模型 |
2. 选择依据
研究潜伏感染 → 豚鼠 或 恒河猴
研究神经痛 → 大鼠（非感染模型）
研究免疫逃逸 → 人源化小鼠
二、带状疱疹动物模型构建病毒株准备
1. 常用VZV毒株
临床分离株（如Oka株、Ellen株）
实验室适应株（如VZV-32、pOka）
重组荧光报告病毒（如VZV-ORF66-GFP）
2. 病毒扩增与滴定
细胞培养：
使用 人胚胎成纤维细胞（HEF） 或 MeWo细胞 扩增VZV。
37℃培养，观察CPE（合胞体形成）。
病毒纯化：超声破碎感染细胞释放病毒。
病毒滴度测定：
噬斑试验（PFU/mL）
qPCR检测病毒DNA拷贝数
三、感染途径与剂量
1. 感染方式
途径 | 方法 | 适用模型 | 特点 |
皮下接种 | 足垫或背部注射 | 豚鼠、恒河猴 | 模拟原发感染 |
鼻腔接种 | 滴鼻感染 | 人源化小鼠 | 呼吸道感染 |
神经节直接注射 | 脊柱旁或三叉神经节注射 | 大鼠（非VZV模型） | 模拟神经痛 |
2. 感染剂量
豚鼠：10?–10? PFU（皮下）
恒河猴：10? PFU（静脉/气管）
人源化小鼠：103–10? PFU（鼻腔）
四、模型评估指标
1. 病毒感染与复制
病毒载量检测（qPCR检测VZV DNA）
背根神经节（DRG）、肺、脾组织
病毒抗原检测（免疫组化/免疫荧光）
2. 潜伏感染与再激活
潜伏期检测：
原位杂交检测VZV潜伏相关转录本（如ORF63）
再激活诱导：
免疫抑制（如环lin酰胺）
紫外线照射（模拟应激）
3. 神jing病理学与疼痛行为
组织病理：
DRG炎症、神经元损伤（HE染色）
疼痛评估（大鼠PHN模型）：
机械痛觉过敏（Von Frey纤维）
热痛觉过敏（Hargreaves试验）
4. 免疫应答
体液免疫：ELISA检测VZV IgG
细胞免疫：
IFN-γ ELISPOT（VZV特异性T细胞）
流式检测CD4?/CD8? T细胞
五、注意事项
1. 生物安全
VZV需在 BSL-2 实验室操作，恒河猴实验需 BSL-3（若用高剂量）。
2. 动物福利
设置 人道终点（如体重下降>20%、严重神经症状）。
疼痛模型需伦理审批（如大鼠PHN实验）。
3. 对照设置
阴性对照：未感染/PBS组
阳性对照：已知致病株（如Oka株）
六、常见问题与优化
1. 豚鼠模型潜伏但不自发再激活
解决方案：
免疫抑制（如泼ni松龙）
神经损伤（坐骨神经结扎）
2. 人源化小鼠感染效率低
优化方案：
提高感染剂量（10? PFU）
使用 人CD34+造血干细胞重建小鼠
3. 大鼠PHN模型不涉及VZV
替代方案：
HSV-1感染模型（部分模拟VZV神经痛）
脊神经结扎（SNL）（纯机械痛模型）
