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带状疱疹动物模型构建

带状疱疹动物模型构建

简要描述:
带状疱疹动物模型构建:带状疱疹(Herpes Zoster, HZ)由水痘-带状疱疹病毒(VZV)再激活引起,目前缺乏完quan模拟人类疾病的动物模型

更新时间:2025-06-24

访问量:46

厂商性质:其他

一、带状疱疹动物模型构建实验动物选择

1. 常用动物及特点

动物模型

优点

缺点

适用研究

豚鼠(Guinea Pig

VZV敏感,可潜伏感染

症状较轻,不易自发再激活

潜伏感染模型

恒河猴Rhesus Macaque

接近人类VZV感染

成本高、伦理限制

疫苗/抗病du药评估

人源化小鼠(huNSG

可感染人VZV

免疫系统不完整

病毒-宿主互作研究

大鼠(Rat

可诱导神经痛

不自然感染VZV

带状疱疹后神经痛(PHN)模型

2. 选择依据

  • 研究潜伏感染 → 豚鼠  恒河猴

  • 研究神经痛 → 大鼠(非感染模型)

  • 研究免疫逃逸 → 人源化小鼠




二、带状疱疹动物模型构建病毒株准备

1. 常用VZV毒株

  • 临床分离株(如Oka株、Ellen株)

  • 实验室适应株(如VZV-32、pOka

  • 重组荧光报告病毒(如VZV-ORF66-GFP

2. 病毒扩增与滴定

  • 细胞培养

    • 使用 人胚胎成纤维细胞(HEF  MeWo细胞 扩增VZV。

    • 37℃培养,观察CPE(合胞体形成)。

  • 病毒纯化:超声破碎感染细胞释放病毒。

  • 病毒滴度测定

    • 噬斑试验(PFU/mL

    • qPCR检测病毒DNA拷贝数




三、感染途径与剂量

1. 感染方式

途径

方法

适用模型

特点

皮下接种

足垫或背部注射

豚鼠、恒河猴

模拟原发感染

鼻腔接种

滴鼻感染

人源化小鼠

呼吸道感染

神经节直接注射

脊柱旁或三叉神经节注射

大鼠(非VZV模型)

模拟神经痛

2. 感染剂量

  • 豚鼠10?10? PFU(皮下)

  • 恒河猴10? PFU(静脉/气管)

  • 人源化小鼠103–10? PFU(鼻腔)




四、模型评估指标

1. 病毒感染与复制

  • 病毒载量检测qPCR检测VZV DNA

    • 背根神经节(DRG)、肺、脾组织

  • 病毒抗原检测(免疫组化/免疫荧光)

2. 潜伏感染与再激活

  • 潜伏期检测

    • 原位杂交检测VZV潜伏相关转录本(如ORF63

  • 再激活诱导

    • 免疫抑制(如环lin酰胺)

    • 紫外线照射(模拟应激)

3. jing病理学与疼痛行为

  • 组织病理

    • DRG炎症、神经元损伤(HE染色)

  • 疼痛评估(大鼠PHN模型):

    • 机械痛觉过敏(Von Frey纤维)

    • 热痛觉过敏(Hargreaves试验)

4. 免疫应答

  • 体液免疫ELISA检测VZV IgG

  • 细胞免疫

    • IFN-γ ELISPOTVZV特异性T细胞)

    • 流式检测CD4?/CD8? T细胞




五、注意事项

1. 生物安全

  • VZV需在 BSL-2 实验室操作,恒河猴实验需 BSL-3(若用高剂量)。

2. 动物福利

  • 设置 人道终点(如体重下降>20%、严重神经症状)。

  • 疼痛模型需伦理审批(如大鼠PHN实验)。

3. 对照设置

  • 阴性对照:未感染/PBS

  • 阳性对照:已知致病株(如Oka株)




六、常见问题与优化

1. 豚鼠模型潜伏但不自发再激活

  • 解决方案

    • 免疫抑制(如泼ni松龙)

    • 神经损伤(坐骨神经结扎)

2. 人源化小鼠感染效率低

  • 优化方案

    • 提高感染剂量(10? PFU

    • 使用 CD34+造血干细胞重建小鼠

3. 大鼠PHN模型不涉及VZV

  • 替代方案

    • HSV-1感染模型(部分模拟VZV神经痛)

    • 脊神经结扎(SNL(纯机械痛模型)

 


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