一、流感动物模型构建实验动物选择
常用动物
小鼠（BALB/c、C57BL/6）：常用，成本低，易操作，但需适应病毒（如H1N1需小鼠适应株）。
雪貂：对流感病毒高度敏感，可模拟人类症状（发热、喷嚏等），但成本高、饲养复杂。
豚鼠：适用于病毒传播研究。
非人灵长类动物（如猕猴）：接近人类免疫反应，但伦理和成本限制高。
选择依据
研究目的（致病性、传播性、免疫应答等）；
病毒宿主适应性（如禽liu感病毒常需雪貂）。
二、病毒株准备
病毒来源
临床分离株（需适应动物宿主，如小鼠连续传代）；
实验室标准株（如A/Puerto Rico/8/1934 H1N1）。
病毒扩增与滴定
通过MDCK细胞或鸡胚扩增病毒；
测定TCID??或PFU（空斑形成单位）以确定感染剂量。
三、流感动物模型构建感染途径与剂量
感染途径
鼻腔接种（常用）：模拟自然感染，轻麻醉后滴注病毒液（小鼠50μL，雪貂500μL）；
气管内接种：需手术暴露气管，用于深部感染研究；
气溶胶暴露：模拟空气传播，需专用设备。
感染剂量
预实验确定LD??或MLD??（半数致死量）；
典型剂量：小鼠103–10? PFU，雪貂10?–10? PFU。
四、模型评估指标
临床症状
体重下降（>15%需安乐s）；
活动减少、竖毛、呼吸急促等。
病毒学指标
肺组织病毒载量（qPCR或噬斑试验）；
鼻洗液/气管分泌物病毒滴度。
病理学分析
肺组织HE染色（炎症、出血、肺泡损伤）；
免疫组化检测病毒抗原分布。
免疫应答
血清抗体（ELISA检测IgG/IgM）；
细胞免疫（流式检测T细胞亚群）。
五、注意事项
生物安全
流感病毒需在BSL-2及以上实验室操作；
禽liu感高致病株（如H5N1）需BSL-3。
动物福利
遵循“3R原则"（减少、替代、优化）；
设置人道终点（如体重下降>20%需终止）。
对照设置
阴性对照（PBS或未感染组）；
阳性对照（已知毒力株）。
六、常见问题与优化
低致病性病毒不发病：可提高剂量或使用免疫缺陷小鼠（如STAT1?/?）；
动物个体差异：增加样本量（每组至少5-8只）；
传播模型构建：需共饲养感染与未感染动物，监测接触传播。
