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流感动物模型构建

流感动物模型构建

简要描述:
流感动物模型构建是研究流感病毒致病机制、疫苗和药物评价的重要手段

更新时间:2025-06-24

访问量:40

厂商性质:其他

一、流感动物模型构建实验动物选择

  1. 常用动物

    • 小鼠(BALB/c、C57BL/6):常用,成本低,易操作,但需适应病毒(如H1N1需小鼠适应株)。

    • 雪貂:对流感病毒高度敏感,可模拟人类症状(发热、喷嚏等),但成本高、饲养复杂。

    • 豚鼠:适用于病毒传播研究。

    • 非人灵长类动物(如猕猴):接近人类免疫反应,但伦理和成本限制高。

  2. 选择依据

    • 研究目的(致病性、传播性、免疫应答等);

    • 病毒宿主适应性(如禽liu感病毒常需雪貂)。


二、病毒株准备

  1. 病毒来源

    • 临床分离株(需适应动物宿主,如小鼠连续传代);

    • 实验室标准株(如A/Puerto Rico/8/1934 H1N1)。

  2. 病毒扩增与滴定

    • 通过MDCK细胞或鸡胚扩增病毒;

    • 测定TCID??或PFU(空斑形成单位)以确定感染剂量。


三、流感动物模型构建感染途径与剂量

  1. 感染途径

    • 鼻腔接种(常用):模拟自然感染,轻麻醉后滴注病毒液(小鼠50μL,雪貂500μL);

    • 气管内接种:需手术暴露气管,用于深部感染研究;

    • 气溶胶暴露:模拟空气传播,需专用设备。

  2. 感染剂量

    • 预实验确定LD??或MLD??(半数致死量);

    • 典型剂量:小鼠103–10? PFU,雪貂10?–10? PFU。


四、模型评估指标

  1. 临床症状

    • 体重下降(>15%需安乐s);

    • 活动减少、竖毛、呼吸急促等。

  2. 病毒学指标

    • 肺组织病毒载量(qPCR或噬斑试验);

    • 鼻洗液/气管分泌物病毒滴度。

  3. 病理学分析

    • 肺组织HE染色(炎症、出血、肺泡损伤);

    • 免疫组化检测病毒抗原分布。

  4. 免疫应答

    • 血清抗体(ELISA检测IgG/IgM);

    • 细胞免疫(流式检测T细胞亚群)。


五、注意事项

  1. 生物安全

    • 流感病毒需在BSL-2及以上实验室操作;

    • 禽liu感高致病株(如H5N1)需BSL-3。

  2. 动物福利

    • 遵循“3R原则"(减少、替代、优化);

    • 设置人道终点(如体重下降>20%需终止)。

  3. 对照设置

    • 阴性对照(PBS或未感染组);

    • 阳性对照(已知毒力株)。


六、常见问题与优化

  • 低致病性病毒不发病:可提高剂量或使用免疫缺陷小鼠(如STAT1?/?);

  • 动物个体差异:增加样本量(每组至少5-8只);

  • 传播模型构建:需共饲养感染与未感染动物,监测接触传播。



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